FISH探針加樣的注意事項

　　FISH探針可分為位點特異性探針和著絲粒探針，位點特異性探針又可分為計數(shù)探針和融合/分離探針。計數(shù)探針是通過標記一段特異性的DNA片段，通過計數(shù)信號的數(shù)量而判斷染色體或基因狀態(tài)的一種標記探針。由于正常人的染色體/基因是二倍體，那么正常人的檢測信號就是兩個，當信號多于兩個或者少于兩個，便可判斷染色體或者基因發(fā)生了異常。

　　FISH探針基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針分子特異性結合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析。

　　該技術具有快速、安全、靈敏度高以及探針可長期保存等特點，目前已廣泛應用于細胞遺傳學、腫瘤生物學、基因定位、基因作圖、基因擴增、產(chǎn)前診斷及哺乳動物染色體進化研究等領域。

　　FISH探針的加樣：參照選用廠商推薦或經(jīng)過本實驗室有效性驗證納入標準化操作流程文件的探針加樣量，加到待雜交組織中央處，使用合適的蓋玻片，橡膠水泥密封四邊。

　　注意事項：

　　探針的使用和配制遵照本單位選用試劑的產(chǎn)品說明書操作；

　　蓋玻片一般采用硅化蓋玻片或無菌的蠟膜；

　　注意環(huán)境光強度，避免太陽光或強烈的光照；

　　加蓋玻片時注意不要留有氣泡，避免因氣泡造成干片現(xiàn)象，導致無雜交信號或雜交率降低；

　　蓋玻片邊緣封膠不嚴密也會出現(xiàn)干片現(xiàn)象。